产品名称:GST树脂蛋白纯化试剂

GSH-Sepharose Resin
GST重组蛋白质亲和纯化树脂

通过融合GST（glutathione-S-transferase）进行蛋白的表达纯化是一种非常简便的蛋白纯化方法。目标蛋白的基因连接在GST基因之后，通过表达，目标蛋白就融合在GST之后。GST大小为~26KD。因为GST对还原性谷胱甘肽有极强的亲和力，所以GST融合蛋白纯化的一般策略是：将GST融合蛋白结合到偶联有谷胱甘肽的层析柱上，然后洗掉其他杂蛋白，最后洗脱得到GST融合蛋白。SNBC GSH-Sepharose Resin 就是专为从细菌、酵母和细胞等中快速抽提纯化GST融合蛋白而设计的。
技术参数：

试剂：
1、  1X PBS pH7.4
2、Wash buffer I：（临用前加入PMSF等蛋白酶抑制剂）
20mM Tris-HCl pH8.0
0.1M NaCl
10％ glycerol
1% Triton X-100
3、elution buffer：（需新鲜配制，临用前加入PMSF等蛋白酶抑制剂）
10mM glutathione
20mM Tris-HCl pH8.0
4、Wash buffer II：
50mM Tris-HCl pH8.0
3M NaCl
5、Wash buffer III：
0.1M NaOAc pH4.5
0.5M NaCl
6、Wash buffer IV：
1X PBS（pH7.4） with 0.5% Triton X-100
准备：
1、标准方法表达GST融合蛋白，SDS-PAGE检测蛋白的可溶性质。若蛋白为可溶性表达，进行下列的操作。
2、悬浮GST树脂，加入层析柱中。10倍柱体积的1X PBS清洗树脂。4℃保存备用。
蛋白纯化：
1、蛋白上清通过高速离心或0.45um虑膜过滤去除大颗粒杂质，上样，流速为0.5－1 ml/min。
2、10倍柱床体积的Wash buffer I 洗树脂。
3、3倍柱床体积elution buffer洗脱，收集。
4、5倍柱床体积1X PBS清洗层析柱，4℃保存。
树脂再生：
1、3倍Wash buffer II洗树脂
2、3倍Wash buffer III洗树脂
3、3倍Wash buffer IV洗树脂（也可用70%乙醇）
4、3倍1X PBS洗树脂
保存
1、短时间保存可将树脂保存于1X PBS，4℃；
2、长期保存将树脂保存于20%乙醇中，置于4℃。
问题与解决