免疫沉淀抽提试剂SP-Lytics IP LY008

Y-CelLytics B      Yeast Cell Protein Extraction Reagent

产品编号: LY008 Y-CeLytics B

包装规格：100ml, 500ml
产品组成：
1)   Tris, NaCl等配制的水溶性中性缓冲液。
2)   不含磷酸酶活性抑制剂。
3)   内含高效不可透析Detergent。
4)   Glass Beads
保存条件：室温。
用途和适用范围：用玻璃珠和特定的裂解液破酵母，抽提酵母蛋白质。
特别说明：
1)  所有试剂，用品都需要冷却后使用。
2)  抽提需要准备和加入酵母蛋白酶抑制剂（Yeast/Fungal Protease Inhibitor Cocktail）。
3)  抽提过程中准备和加入DTT，能显著提高裂解效率。
4)  抽提物蛋白质定量采用Bradford法。
5)  如果裂解体系中不加DTT，可以用BCA 法测定。
操作步骤：
1)  离心收集酵母细胞，估计细胞数目或重量。
2)  将酵母转移到塑料容器中，按每克细胞加入5ml或2X107个细胞加入1ml Y-CelLytics B,加入合适的Protease inhibitor cocktail(用法见说明书PI004) 和 DTT（终浓度为5mM），将细胞充分悬浮起来，每5ml裂解液加入500mg玻璃珠子。
3)  高速振荡2分钟，冰冷2分钟。重复该步骤5次。