一氧化氮检测试剂盒
Nitric Oxide Analysis Kit

产品编号：K84272  500rexs
产品说明：一氧化氮（Nitric Oxide）的生物学功能引起生命科学，特别是从事信号传导研究人员的广泛兴趣。人们发现一氧化碳具有神经传递和免疫调节等重要生理作用。NO在体内分布和含量的变化与许多生理机能亦紧密相关，如基因突变和生物肌体中毒等都可能是一氧化氮的释放或调控异常有关。NO本身不稳定， 直接测定相当困难，一般都是通过测定NO的稳定代谢产物NO2-的浓度推算出NO的含量。
适用范围：检测细胞、组织、体液和细胞培养液中NO的含量。
产品组成：

组成	500次 (酶标板法)
NaNO2 Standard (1mM)	25ml
Griess Reagent A	25ml
Griess Reagent B	25ml
Guide	1

注意：
1. 产品注意避光保存，保质期为一年。
2. 用酶标板法比色测定，反应总体积为150ul，可以进行500次测定；如果用可见分光光度计比色杯法测定，可使用的次数取决于比色杯的容量；例如比色杯为1ml, 那么本试剂盒提供的试剂可以进行100次的测定。
3. 本试剂盒提供的标准品使用前需要按要求稀释，测定范围为1-100uM。
用户需要准备的材料：
酶标仪或可见分光光度计，96孔板或比色杯，移液器和枪头
操作步骤：

说明：下列方法是采用酶标仪测定光吸收，反应总体积为150ul；如果采用可见分光光度计比色杯法测定，根据比色杯的容量，按比例放大样品和所用的试剂。所有操作在室温进行，除非特殊说明。
1．样品的准备：样品可以是组织和细胞的抽提液，血清或细胞培养液，体液等，样品使用前需要离心除去不溶物或细胞，收集澄清上清。每个样品50ul。
2．标准品的稀释：用水或与样品相同的缓冲稀释10倍使终浓度为100uM（1体积1mM NaNO2, 9体积的水或缓冲），如果用水稀释，需要测定样品缓冲液对测定的影响。为减少系统和实验误差，每个点需要测定三个平行样。
3．在96孔板依次按下表所要求的加入标准品和待测样品和相关试剂。

样品	标品1	标品2	标品3	标品4	标品5	标品6	标品7	缓冲
100uM NaNO2 (微升)	0	2	4	6	12	25	50	50
水 (微升)	50	48	46	44	38	25	0	0
Griess Reagent A (微升)	50	50	50	50	50	50	50	50
Griess Reagent B (微升)	50	50	50	50	50	50	50	50
混匀后测定OD540nm
NO浓度 （100uM）	0	4	6	12	24	50	100

4．绘制标准曲线，计算出待测样品的浓度。
技术支持：bbst@sh163.net  

文件版本：SH08042702L