CTAB法植物组织基因组DNA小量抽提试剂盒 K711/712
Plant Genomic DNA CTAB Miniprep Kit
CAT# |
SIZE |
PRICE（￥） |
K711 |
50 |
300 |
K712 |
250 |
1200 |
试剂盒组成：
Components and Size |
K711 |
K712 |
Lysis Solution（裂解溶液）(b) |
35ml |
200 ml |
注：
(a) 该方法适用于从植物中抽提基因组DNA。
(b) 内含CTAB，使用前需要65度保温溶解，充分混匀后使用。
(c) RNAase A已灭活除去DNase活性，收到后转移到-20度长期保存。
(d) 除上述试剂外，还需要准备80%乙醇，台式离心机，移液器等
(e) 每毫升Lysis Solution（裂解溶液），可以处理250mg左右的组织。
实验步骤：
1.将Lysis Solution（裂解溶液）、Precipitation Solution (沉淀液)、CTAB/NaCl溶液65度保温至充分溶解，混匀。
2.采集植物的幼嫩组织，用液氮碾磨成粉末，中途不断添加液氮保持样品不解冻。
3.将200mg粉末转移到离心管中，加入600ul Lysis Solution（裂解溶液）（65度预先保温），65度保温60分钟，中途混匀。
4.加600ul Chloroform/Isoamyl Alcohol (氯仿/异戊醇),小心上下颠倒混匀，10000转/分，5分钟。
6.将上清转移到1.5ml离心管中，加入等体积的Precipitation Solution (沉淀液)，小心上下颠倒混匀，65度保温30分钟，4000转/分离心5分钟。离心后应能看到沉淀物，如果不能看到，可以在离心管中补加1/10体积的Precipitation Solution (沉淀液)，37度保温1小时或过夜，然后4000转/分离心5分钟。
7.小心去除上清，加入200ul High Salt (高盐液), 65度保温30分钟左右使沉淀完全溶解，加入2ul RNAse A, 混匀37度保温30分钟。
8.加入120ul Isopropanol（异丙醇），混匀，10000转/分，5分钟。
9.彻底除去上清，加入1ml 80%的乙醇，10000转/分，5分钟。
10.彻底除去上清，再次高速离心一次，用TIP去除管底部的全部溶液，倒置放置10分钟以上。 11.加入50ul TE溶解。-20度保存备用。
