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3S柱离心式ssDNA 小量抽提试剂盒 K211/212

3S Spin M13 ssDNA Miniprep Kit

CAT#	SIZE	PRICE（￥）
K211	50次	300
K212	100次	550

试剂盒组成：

Components and Size	K211 (50 次)	K212 (100 次)	K213 (250次)
3S Column 2.0 ml Collection Tube Solution MPS(a) Solution G Solution B Wash Solution(b) TE pH8.0 Protocol	50根 50只 15 ml 20 ml 10 ml 22 ml 10 ml 1 份	100根 100只 30 ml 40 ml 20 ml 2x22 ml 10 ml 1份	250根 250只 2X40 ml 2X50ml 50ml 5x22ml 30 ml 1份

注意：
(a) 使用将MPS置于冰里(a)使用时将MPS置于冰中预冷。
(b)首次使用前，必须在Wash Solution瓶中加入50 ml无水乙醇，充分混匀后使用。每次使用后将瓶盖盖紧，以保持Wash Solution中的乙醇含量。
制备方法：
1.准备M13感染的细胞培养。M13感染的细胞必须在37℃不停的振荡培养，5-8小时为合适。注意：培养时间太长会导致缺失突变，同时M13RF及来自裂解细胞的基因组DNA和核酸酶的污染将会增加。可以用于噬菌体感染的E. coli必须是F’episome，如JM101, JM109等，培养基可以是LB或2´ YT。
2.10000rpm，室温离心5分钟，除去细菌。
3.将上清1.25 ml转移到干净的1.5ml eppendorf 管中，加入250ml Solution MPS混匀，冰里放置20分钟。注意：Solution MPS为上清的1/5。
4.12000rpm，室温离心10分钟，小心弃取上清，保留噬菌体沉淀。
5.用400ml Solution G将沉淀悬浮起来，室温（20度以上）放置5分钟后，在同一根离心管中加入200ml Solution B，混匀，转移到3S柱中；3S柱放入2.0 ml Collection Tube，室温放置2分钟 6.盖上离心管盖(盖子也可以不盖，但是如果您同时有很多样品，担心混淆或弄翻溶液，建议您盖上盖子)。10000 rpm，室温离心1分钟。

7.取下3S柱，弃取收集管中的液体；将3S柱放回同一根收集管中，加入600ml Wash Solution，10000 rpm，室温离心1分钟。
8.重复步骤7一次。
9.取下3S柱，弃取收集管中的液体；将3S柱放回同一根收集管中， 10,000 rpm，室温离心2分钟。
10.取下3S柱，放入干净无菌的1.5ml Eppendorf管中，在柱内膜中央加入30-50 ml TE pH8.0，室温放置2分钟。注意：如果产率不理想，可以将TE预热到50℃，可提高产率。 11.10,000 rpm，室温离心1分钟。离心管内的溶液为M13 ss DNA样品，可立即使用，也可-20℃保存备用。

Components and Size