产品名称:动物组织PCR模板快速制备和扩增试剂盒

产品编号：K20081
产品价格:   

• 25次模板制备/25次 PCR扩增    价格：580元
• 100次模板制备/100次 PCR扩增  价格：1780元

该试剂盒的主要特点：

• 基因PCR扩增的所需要的模板能在15分钟内就可以完成。
• 制备过程不需要使用制备基因组DNA常用的蛋白酶K。
• 样品无需机械破碎，不需要液氮。
• 没有机溶剂抽提；没有乙醇沉淀。
• 适用多种动物组织，头发，唾液和口腔粘膜拭子，小鼠尾巴等多种样品。
• 制备的基因组样品可以用于基因分型和扩增。
• 高效和使用方便的PCR 扩增系统，仅仅准备引物和样品就可以开展工作。

产品说明:
    本试剂盒包含从动物组织中快速制备和扩增基因组DNA的所有试剂,适用于从人的头发根,小鼠尾巴, 各种动物组织, 唾液, 颊粘膜拭子等样品。扩增样品的处理过程非常简单和有效，不需要使用制备基因组DNA常用的蛋白酶K，样品无需机械破碎，有机溶剂抽提，也不要乙醇沉淀就可以获得扩增所需要的DNA模板，扩增用的基因组DNA模板15分钟就可以准备好。
    本试剂盒提供2X PCR Premix, 内含扩增所需要的Taq, Mg, Buffer, Mg2+，dNTP等，用户只需要加入特定的引物，用去离子水将反应体积调整规定的体积，就可以进行基因的扩增和检测。

说明：本试剂盒在10度以下可以保存数周，长期保存在-20度，尽量避免反复冻融。
本试剂盒不提供的试剂和基本消耗品：
离心管，PCR管和PCR板，PCR仪，离心机，移液器和移液头，水浴或金属浴等
实验操作步骤：
说明：所有步骤均可以在室温操作，除非有特殊说明。
1. 准备试剂：按每个样品需要100ul Extraction Solution和25ul Tissue Preparation Solution, 根据样品的数量在离心管中预先混好，然后分装到离心管中、或样品板的孔中。混好的试剂在2小时内使用。对于泡沫头拭子获得的样品,每个样品需要200u Extraction Solution和25ul Tissue Preparation Solution.
2. 准备样品：

• 动物组织：将组织剪成1mm3大小的块，2-10mg样品。
• 头发：去除发干，保留发根，1-2根发根。
• 小鼠尾巴：0.5-1cm长，新鲜的尾巴要在剪下尾巴的30分钟内使用。
• 唾液：10-20ul；如果用采集卡收集细胞，需要50ul唾液，卡片干燥后使用。
• 颊粘膜拭子:不能使用吸水量大的纤维拭子，如棉花拭子吸收太多的溶液，需要用泡沫头拭子采集口腔刮片,收集口腔细胞。

3. 将处理好的样品转移到步骤1已混好和分装好的离心管中，样品要充分浸泡到溶液中。对于泡沫头拭子，将拭子在溶液中捻转10次左右，然后将拭子在管内壁挤下吸收的液体，弃去拭子。
4. 37度（室温也可以，因为各实验室的温度高低不同，扩增的效果有可能不同）保温10分钟，中途间或振荡一到两次。
5. 95度处理3-5分钟。

6. 加入100ul Neutralization Solution,振荡混合。样品可以4度或-20度放置备用或立即用于PCR扩增。
7. PCR扩增：
按下列次序加入，加入试剂用Tip混一混，总体积为20ul
       Water                        3ul
       2X PCR Premix               10ul
       Forward Primer (10uM)        1ul
       Reverse Primer (10uM)        1ul
       Tissue Extract (步骤5)         5ul (如果用8ul，反应不需补加水调整体积)

      试剂全部加好后，简单离心，将所有试剂收集到管底。

     对于带热盖的PCR仪，可以立即PCR扩增，否则需要加入20ul石蜡油防止液体在扩增程中蒸发。扩增的条件用户需要根据扩增产物的长度，引物的特性，模板来源和使用何种类型的PCR仪等条件而定。一般的程序如下：94度变性2分钟，然后94度30秒，52度（根据引物而变化）复性，72度延伸，60秒（1kb以下），该过程循环35次（30-45次），循环结束后，72度，10分钟，4度或室温保持。

8.  扩增产品的检测：扩增的产物用琼脂糖电泳检测，分析扩增结果。