Go3S 柱离心式PCR产物回收试剂盒V3.1 K141

3S PCR Product Purification Kit  V3.1

试剂盒组成：

注：
(a)  首次使用前必须在Wash Solution瓶中加入50ml无水乙醇，充分混匀后使用。每次使用后将瓶盖盖紧，以保持Wash Solution中的乙醇含量。
(b)  TE pH8.0或者水均可以用于洗脱，但是水洗脱效率通常要低一些。测序样品请用水洗脱。
(c)   该试剂盒不能用于从Agarose胶中回收DNA片段。
试剂盒DNA回收率：
    3S 柱对100bp以上的DNA片段有较好的结合性能和回收率，回收率在60%以上。
主要用途：
1.  去除PCR反应中 dNTPs，引物，矿物油和聚合酶等。
2.  从反应体系中去除限制性内切酶或修饰酶，回收和浓缩DNA。
操作步骤：
I. 从PCR反应体系中回收PCR扩增产物：
1. PCR结束后，从PCR反应管中将反应液移至干净的1.5 ml Eppendorf离心管中，加入4倍体积的Solution BS混匀。无论样品量多少，最少需要使用400ul Solution BS。
2. 将3S柱放入收集管中，把混合液转移到柱内，不要盖上离心管盖，室温放置2分钟；盖上离心管盖(盖子也可以不盖，但是如果您同时有很多样品，担心混淆或弄翻溶液，建议您盖上离心管盖子)，用台式离心机高速离心（10000 rpm）1分钟。
3. 倒掉收集管中的废液，将3S柱放入同一个收集管中，加入600µl Wash Solution，高速离心（10000 rpm）1分钟。
4. 重复步骤3一次。
5. 倒掉收集管中的废液，将3S柱放入同一个收集管中，高速离心（10,000 rpm）２分钟。
6. 将3S柱放入一根新的1.5ml离心管中，在3S柱膜中央加30µl TE或水，不要盖上离心管盖，室温或37℃放置2分钟。
◆提高洗脱温度有利于提高DNA 的洗脱效率。
7. 盖上离心管盖，10,000rpm高速离心1分钟，离心管中的液体即为回收的DNA片段，可立即使用或保存于-20℃备用。
注意：用该方法纯化PCR产物需要注意几个问题：
(a)  扩增产物的特异性必须非常高；
(b)  对于特异性差的反应，应用Agarose胶中回收目的片段，请用BBST的 K111, K131 DNA胶回收试剂盒。模板DNA的存在，应不影响下游工作，对于用质粒模板要特别当心。
II. 从溶液中回收DNA：
   根据溶液的体积和所要回收DNA的含量，加入5倍体积的Solution BS。如果溶液的体积小于50ul, 至少加入400µl Solution BS混匀。将溶液全部转移到3S柱。下面的步骤同从PCR反应体系中回收PCR扩增产物的步骤2-7。