3S柱离心式琼脂糖DNA快速回收试剂盒K131/132/133

CAT#

SIZE

PRICE(¥)

K131

50

225

K132

100

250

K133

250

750

试剂盒组成

试剂盒组成

K131(50 次)

K132(100次)

K133 (250次)

3S Column
Collection Tube
Solution SN
Solution B
Wash Solution( a) 
TE
说明书

50支
50支
30 ml
10 ml
22 ml
10 ml
1份

100支
100支
60 ml
10ml
2x 22ml
10 ml
1份

250支
250支
150ml
25ml
5x 22ml
10ml
1份


(a)      首次使用前,必须在Wash Solution瓶中加入50 ml无水乙醇,充分混匀后使用。每次使用后将瓶盖盖紧,以保持Wash Solution中的乙醇含量。
(b)      TE pH8.0或者水均可以用于洗脱,测序样品请用水洗脱。

试剂盒DNA回收率
    3S柱对100bp以上的DNA片段有较好的结合性能和回收率,回收率在60%以上。
主要用途
1)从TBE或TAE Agarose 胶中回收DNA片段。
2)从溶液中回收和浓缩DNA,去除反应体系中的蛋白质。
                                                                 

操作步骤
从Agarose胶中回收DNA:
1.  用Agarose胶电泳将目的DNA片段与其它DNA尽可能分开,然后用干净的手术刀割下含所要回收DNA的琼脂块,放入1.5 ml离心管中。判定DNA片段的位置时,要尽可能使用长波长UV,在UV下照射的时间应尽可能短。
2.  按每100mg Agarose 胶加入400 µl Solution SN,置于55-65℃水浴中5分钟,中途混匀几次,至胶完全融化。胶融化后每400ul Solution SN加入100ul Solution B,混匀。注意:对于高浓度的胶 (1.5-2%),每100 mg胶加入500 µl Solution SN, 加热融胶的时间可以延长到15分钟,以保证胶全部融化,胶融化后加入100ul Solution B, 混匀。
3.  将3S柱放入2 ml收集管中, 将融化的胶溶液转移到3S柱中, 让盖子开着,室温放置2分钟。盖上离心管盖(盖子也可以不盖,但是如果您同时有很多样品,担心混淆或弄翻溶液,建议您盖上盖子),室温离心(10,000 rpm)1分钟。
4.  取下3S柱,倒掉收集管中的废液,将3S柱放入同一个收集管中,加入600 µl Wash Solution,室温离心(10,000 rpm)1分钟。
5.  重复步骤4一次。
6.  取下3S柱,倒掉收集管中的废液,将3S柱放入同一个收集管中,室温高速离心(10000 rpm)2分钟。
7.  将3S柱放入一根新的1.5ml离心管中,在3S柱子膜中央加30 µl TE或水,不要盖上离心管盖,室温放置2分钟。注意:提高洗脱温度有利于提高DNA 的洗脱效率。也可以用预热的TE或水洗脱。
8.  盖上离心管盖(盖子也可以不盖,但是如果您同时有很多样品,担心混淆或弄翻溶液,建议您盖上盖子),10,000rpm高速离心1分钟,离心管中的液体即为回收的DNA片段,可立即使用或保存于-20℃备用。

从溶液中回收和浓缩DNA

  1. 根据溶液的体积和所要回收DNA的含量,加入5倍体积的Solution SN。如果溶液的体积不足100µl, 加TE补足到100µl,再加500µl Solution SN和100ul SolutionB,混匀。
以下同从Agarose胶中回收DNA的步骤3-8。